Определение гемостатической активности гидрофильных гранулированных сорбентов с использованием электрокоагулографа Н-334

Чередников Е.Ф., д.м.н., проф., зав. кафедрой факультетской хирургии Романцов М.Н., Баранников С.В., Попов Арт. В., Литовкина Т.Е., Путилин С.Г., Сергеев И.А.

ВГМУ им. Н.Н. Бурденко

г. Воронеж

Актуальность

Одной из актуальных проблем неотложной хирургии являются гастродуоденальные кровотечения. [1,3,8]Пути улучшения результатов лечения больных с гастродуоденальными кровотечениями из верхнего отдела желудочнокишечного тракта многие авторы видят в поиске новых средств и усовершенствовании способов эндоскопического гемостаза на фоне комплексной противоязвенной терапии. [4,5,8]Перспективным, на наш взгляд, является применение гидрофильных гранулированных сорбентов для эндоскопического гемостаза при гастродуоденальных кровотечениях. [1,3,5,8]

Целью работы явилось изучение особенностей поведения гидрофильных гранулированных сорбентов при их взаимодействии с кровью и сравнительная оценка их гемостатической активности.

Материал и методы

Экспериментальное исследование проведено с кровью здорового донора. В качестве гидрофильных гранулированных сорбентов были использованы: аниловин, гелевин, диовин, диотевин, сефадекс марки G-25.

Оценка влияния гранулированных сорбентов на систему гемостаза проводилась путём дифференцированной элетрокоагулографии с использованием электрокоагулографа Н-334. [2,6,9]

В эксперименте in vitro с кровью донора проводили ряд опытов. Кровь для исследования получали из кубитальной вены сухой иглой для венепункций. После удаления первых капель крови, свободно вытекающих из иглы, заполняли кровью пробирку, содержащую 3,8 % раствор цитрата натрия в соотношении 9:1 соответственно. Содержимое пробирки осторожно перемешивали, наклоняя несколько раз пробирку. Ячейки коагулографа Н-334 предварительно прогревали в термостатирующей камере прибора до 37 о С. Проводили запись электрокоагулограммы цитратной крови. Для этого с помощью микропипетки в ячейку вносили 0,1 мл цитратной крови, затем ячейку, заполненную цитратной кровью с раствором кальция, помещали в термостатирующую камеру, укрепляя в качающемся ячейкодержателе. Камеру закрывали и включали мотор, одновременно останавливая секундомер. Время от момента добавления раствора хлорида кальция до начала записи электрокоагулограммы (t0), фиксируемое секундомером, в дальнейшем использовали для определения истинных значений временных показателей электрокоагулограммы.

Для оценки гемостатических свойств сорбентов предварительно прогретую ячейку коагулографа вносили 0,1 мл цитратной крови, далее в ячейку вносили по 1,0 мг каждого изучаемого нами порошкообразного гранулированного сорбента (аниловин, гелевин, диовин, диотевин, сефадекс марки G-25) и добавляли 0,1 мл 0,025М раствора хлорида кальция, включали секундомер. Ячейку, заполненную цитратной кровью с раствором кальция и гранулированным порошкообразным препаратом, помещали в термостатирующую камеру, укрепляя в качающемся ячейкодержателе. Камеру закрывали и включали мотор, одновременно останавливая секундомер.

Оценку коагулограммы производили по следующим параметрам:

t0 — время, прошедшее от момента взятия крови до начала записи; t1 — время начала свертывания; t2 — время конца свертывания; t3 — начало ретракции и фибринолиза; t — продолжительность процесса свертывания; Vc1скорость свертывания за первую минуту; Vc2 — скорость свертывания за вторую минуту; Vc3 — скорость свертывания за третью минуту; Am — амплитуда максимальная, A0 — амплитуда минимальная (отражает плотность сгустка).

Результаты

Проведенный эксперимент in vitro позволил нам получить данные о влиянии различных гидрофильных гранулированных сорбентов на систему свертывания крови. Это позволило дать сравнительную оценку гемостатической активности каждого из сорбентов.

Результаты проведенных исследований представлены в таблице.

Как видно из таблицы, исследуемая кровь здорового человека начинает процесс свертывания t1 — на 186 секунде. При добавлении гранулированного сорбента достигается ускорение начала свертывания крови: гелевин начинает процесс свёртывания крови t1 — на 82 секунде, диотевин — t1 — на 64 секунде, диовин — t1 — на 58 секунде, аниловин — t1 — на 46 секунде и сефадекс марки G-25 — t1 — на 42 секунде. Процесс свертывания крови у здорового человека оканчивается t2 — на 384 секунде. Гелевин и аниловин заканчивают этот процесс t2 — на 322 секунде, диовин — t2 — на 178 секунде, диотевин — t2 — на 202 секунде и сефадекс марки G-25 t2 — на 162 секунде. Продолжительность свертывания крови у здорового человека у испытуемого составила t — 198 секунд. Гелевин и аниловин превысили этот показатель t — на 240 секунд и 276 секунд соответственно. У диовина и сефадекса G-25 время продолжительность свертывания составила t — по 120 секунд, у диотевин общее время свертывания крови t — за 138 секунд.

Подводя итоги скорости свёртывания крови в течении первых трёх минут, было отмечено, что у здорового человека скорость свёртывания составила Vc1=0,183, Vc2=0,283, Vc3=0,016. Диотевин, гелевин и аниловин на первых двух минутах отставали от базовой скорости и только на третьей минуте скорость свёртывания крови у них возросла и составила Vc3=0,43, 0,15, и 0,11 соответственно. Диовин образовал сгусток в течение первых двух минут: на первой минуте скорость свёртывания в начале отставала от показателей крови здорового человека и составляла Vc1=0,13, а на второй минуте скорость свёртывания у диовина увеличилась до Vc2=0,48. Сефадекс марки G-25 так же образует сгусток за две минуты, но основная скорость свертывания крови приходится на первую минуту. Как видно из таблицы, свертывание крови у сефадекса марки

Таблица 1. Сравнительные результаты исследования системы гемостаза in vitro с использованием гидрофильных гранулированных сорбентов

G-25 на первой минуте составило Vc1=0,383, на второй минуте скорость снизилась до Vc2=0,216, но остается достаточно высокой. Плотность сгустка у всех последующих препаратов была примерно одинаковой. Показатель фибринолиза характеризует устойчивость сгустка. Этот показатель у всех гранулированных сорбентов примерно был идентичен.

Таким образом, лидирующими по своей гемостатической активности среди гидрофильных гранулированных сорбентов являются диовин, диотевин и сефадекс марки G-25. По сокращению времени свертывания они находятся на сравнительно одинаковом уровне, но сефадекс марки G-25 начинает процесс свертывания крови раньше всех. Так же и скорость у данного сорбента максимальная именно на первой минуте.

Выводы

1. Гидрофильные гранулированные сорбенты обладают в разной степени неспецифическими гемостатическими свойствами, что делает целесообразным их применение при эндоскопическом лечении эрозивно-язвенных гастродуоденальных кровотечений.
2. Для эндоскопического гемостаза с типом кровотечения FI — FIIAB из исследуемых сорбентов более предпочтителен сефадекс марки G-25.

Литература

1. Чередников Е. Ф. Лечение больных с неязвенными гастродуоденальными кровотечениями с использованием новых технологий /Е.Ф. Чередников [и др.]// Вестник хирургической гастроэнтерологии.— 2009.— No 2.— с. 27–32. 

2. Воробьев В. Б., Анализ состояния гемостаза с использованием новых возможностей дифференцированной электрокоагулографии /Воробьев В. Б., Бехтерева Н.А., Ускова Т.В.// Фундаментальные исследования.— 2004.— No 5.— с. 19–21. 

3. Деряева О. Г. Комплексное лечение эрозивно-язвенных гастродуоденальных кровотечений у больных многопрофильного стационара/ Деряева О.Г., Чередников Е.Ф.//Системный анализ и управление в биомедицинских системах.—2014. Т. 13. No 3.— с. 725–730. 

4. Диагностика и лечение больных с гастродуоденальными кровотечениями в специализированном центре: методические рекомендации под ред. проф. Е.Ф. Чередникова.— Воронеж,2014.—32с. 

5. Чередников Е. Ф. Комплексное лечение неязвенных гастродуоденальных кровотечений с использованием внутрипросветной эндоскопии/ Чередников Е.Ф., Баткаев А, Р.// Вестник экспериментальной и клинической хирургии.—2009.— Т. 2, No 4.— с 291–304. 

6. Долгов В.В., Свирин П.В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза.— М.— Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2005.—227 с, 150 ил. ISBN5–94789–114-Х 7. Синьков С.В. Роль инструментальных методов диагностики в оценке степени дисфункции системы гемостаза / Синьков С.В., Заболотских И.Б., Шапошников С.А. // Вестник интенсивной терапии.—2009.— No 5.— С. 102–105. 

7. Адианов В. В. Оптимизация лечения гастродуоденальных кровотечений у больных повышенного операционного риска /Адианов В.В., Чередников Е.Ф.// Системный анализ и управление в биомедицинских системах.—2014. Т. 13. No 4.— с. 841–846. 


Johonsson P.I. Freatment of massissively bleeding patients^ introducing real-time monitoring, transtusion packages and 
trombelastography //ISBT science series-2007.— Vol/ 29(9)/-P/ 159–167.