Сравнительная оценка гемостатической активности новых гемостатических препаратов и обогащенной тромбоцитами плазмы в эксперименте in vitro с использованием электрокоагулографа Н-334

Чередников Е.Ф., д.м.н., проф., зав. кафедрой факультетской хирургии


Кашурникова М.А., Баранников С.В., Романцов М.Н., Овчинников И.Ф., Перерва О.А., Мячина Д.С.

ВГМУ им. Н.Н. Бурденко


г. Воронеж

Одной из актуальных проблем хирургии гастродуоденальных кровотечений остается вопрос эндоскопического гемостаза, от которого в наибольшей степени зависит благоприятное течение заболевания у больных с желудочно-кишечными кровотечениями [1,4,8,9].

Современная медицина имеет широкий спектр лабораторных тестов определения и контроля гемостаза у больных, в частности, с гастродуоденальными кровотечениями. Из традиционных коагулографических тестов чаще используют хронометрические показатели АЧТВ, МНО (форма представления протромбинового времени), содержание фибриногена, подсчет числа тромбоцитов [5,6]. Более объективным в этом отношении функциональные методы оценки гемостаза, из которых следует отметить тромбоэластографию.

Сегодня не потерял свою актуальность простой, доступный, надежный метод оценки состояния системы гемостаза путем дифференцированной электрокоагулографии с использованием электрокоагулографа Н-334 [3,7].

На наш взгляд появление работ по применению обогащенной тромбоцитами плазмы и новых местных гемостатических препаратов является перспективным в поисках новых способов эндоскопического гемостаза [1,2,3,8].

Целью работы явилось изучение особенностей поведения новых гемостатических средств и обогащенной тромбоцитами плазмы при их взаимодействии с кровью.

Материалы и методы исследования

Экспериментальное исследование выполнено с кровью здоровых добровольцев. В качестве новых местных гемостатических средств были использованы желпластан, новосэвен, полигемостат и обогащенная тромбоцитами плазма. Гемостатическая активность препаратов оценивалась методом дифференцированной элекрокоагулографии с использованием электрокоагулографа Н-334[3,7].

В экспериментах in vitro с кровью каждого донора проводили несколько опытов. В первом опыте кювета с донорской кровью была без исследуемого материала и использовалась как контрольная.

Во втором опыте производилась оценка свойств гемостатических препаратов путем добавления в ячейку прибора фиксированного объема изучаемого нами гемостатического препарата и обогащенной тромбоцитами плазмы.

Оценку коагулограмм производили по следующим параметрам: t0 — время прошедшее от момента взятия крови до начала записи; t1 — время начала свертывания; t2 — время конца свертывания; t3 — начало ретракции и фибринолиза; t — продолжительность процесса свертывания; Vc1 — скорость свертывания за первую минуту; Vc2 — скорость свертывания за вторую минуту; Vc3 — скорость свертывания за третью минуту; Aм — амплитуда максимальная; A0 — амплитуда минимальная (отражает плотность сгустка).

Результаты исследований

Итоги проведенного эксперимента представлены в таблице. Как видно из таблицы, кровь здорового человека начинает процесс свертывания с t1–298 с. При использовании местных гемостатических средств сгусток начинает формироваться раньше: при добавлении новосэвена сгусток начинает формироваться уже с t1–48 с., при использовании желпластана с t1– 54 с., полигемостата с t1–240 с. При использовании обогащенной тромбоцитами плазмы сгусток начинает формироваться с t1–76 с. Таким образом, можно говорить, что изучаемые нами препараты ускоряют время начала формирования сгустка.

Процесс свертывания крови у здорового человека оканчивается t2 — на 370 с. При использовании желпластана сгусток заканчивает формироваться уже t2 — на 144 с., для новосэвена этот показатель составил t2–156 с., для полигемостата t2–420 с. При изучении обогащенной тромбоцитами плазмы сгусток сформировался t2 — на 130 с., что является хорошим показателем.

Говоря о продолжительности формирования сгустка, следует отметить, что у здорового человека процесс формирования сгустка занимает t — 72 с. Процесс свертывания происходит преимущественно на первой минуте от начала формирования сгустка. Скорость свертывания за первую минуту у здорового человека для исследуемой крови составила Vc1–0,55. При использовании местных гемостатических средств продолжительность формирования сгустка (t) для новосэвена и желпластана, так же как и у крови здорового человека, занимает около 2 минут, но при этом, необходимо отметить, что скорость образования сгустка на первой минуте для новосэвена и желпластана увеличивается и составляет Vc1–0.66, и 0,71 соответственно. При применении обогащенной тромбоцитами плазмы сгусток формируется уже за t — 54 с., что обусловлено высокой скоростью свертывания за первую минуту, которая составляет Vc1–0.83. Дольше всего сгусток образуется при применении полигемостата t — 180 с., что определяется низким показателем скорости свертывания за первую минуту Vc1–0.16. Таким образом, применение местных гемостатических средств желпластана, новосэвена и обогащенной тромбоцитами плазмы позволяет ускорить процесс свертывания уже на первой минуте.

При изучении плотности сгустка оказалось, что этот показатель для всех исследуемых препаратов был примерно одинаковым.

Показатель фибринолиза характеризует устойчивость сгустка. При изучении крови здорового человека процесс фибринолиза начинается с t3–418 с. При использовании местных гемостатических средств процесс фибринолиза начинается для полигемостата с t3–915 с., для желпластана с t3–618 с., для новосэвена с t3–330 с., для обогащенной тромбоцитами плазмы с t3–346 с. Таким образом, процесс, фибринолиза наилучшим образом замедляют полигемостат и желпластан.

Таблица 1. Сравнительные результаты исследования системы свертывания крови с использованием гемостатических средств и обогащенной тромбоцитами плазмы

Выводы

1. Исследуемые порошкообразные гемостатические средства (желпластан, новосэвен, полигемостат) и обогащенная тромбоцитами плазма обладают высокой гемостатической активностью.
2. Представляется целесообразным проведение дальнейших исследований по применению желпластана, полигемостата, новосэвена и обогащенной тромбоцитами плазмы для эндоскопического гемостаза при гастродуоденальных кровотечениях.

Литература

1. Адианов В. В. Оптимизация лечения гастродуоденальных кровотечений у больных повышенного операционного риска /Адианов В.В,, Чередников Е.Ф.// Системный анализ и управление в биомедицинских системах.—2014. Т. 13. No 4.— с. 841–846. 

2. Ачкасов Е. Е. Использование обогащенной тромбоцитами факторами роста аутоплазмы в хирургии и травматологии / Е.Е. Ачкасов., А.А. Ульянов, Э.Н. Безуглов, А.В. Пугачев, К.А. Володина, Н.К. Жижин, О.Н. Егорова// Хирургия.— 2014.— 
No 9 с. 48–53. 

3. Воробьев В. Б., Анализ состояния гемостаза с использованием новых возможностей дифференцированной электрокоагу
лографии /Воробьев В. Б., Бехтерева Н.А., Ускова Т.В.// Фундаментальные исследования.— 2004.— No 5.— с. 19–21. 

4. Деряева О. Г. Комплексное лечение эрозивно-язвенных гастродуоденальных кровотечений у больных многопрофильного стационара/ Деряева О.Г., Чередников Е.Ф.//Системный анализ и управление в биомедицинских системах.—2014. Т. 13. 
No 3.— с. 725–730. 

5. Диагностика и лечение больных с гастродуоденальными кровотечениями в специализированном центре: методические 
рекомендации под ред. проф. Е.Ф. Чередникова.— Воронеж, 2014.—32 с. 

6. Долгов В.В., Свирин П.В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза.— М.— Тверь: ООО «Издательство «Триада», 
—227 с, 150 ил. ISBN5–94789–114-Х. 

7. Синьков С. В. Роль инструментальных методов диагностики в оценке степени дисфункции системы гемостаза / Синь
ков С.В., Заболотских И.Б., Шапошников С.А. // Вестник интенсивной терапии.— 2009.— No 5.— С. 102–105. 

8. Чередников Е. Ф. Лечение больных с неязвенными гастродуоденальными кровотечениями с использованием новых техно
логий /Е.Ф. Чередников [и др.]// Вестник хирургической гастроэнтерологии.— 2009.— No 2.— с. 27–32. 

9. Чередников Е. Ф. Комплексное лечение неязвенных гастродуоденальных кровотечений с использованием внутрипросветной эндоскопии/ Чередников Е.Ф., Баткаев А, Р.// Вестник экспериментальной и клинической хирургии.—2009.— Т. 2, 
No 4.— с 291–304.